6 курс / Иммунология / Реакции иммунитета
.docРЕАКЦИИ ИММУНИТЕТА. РЕАКЦИЯ АГГЛЮТИНАЦИИ. РЕАКЦИЯ ПРЕЦИПИТАЦИИ.
РЕАКЦИЯ АГГЛЮТИНАЦИИ Агглютинация – склеивание и выпадение в осадок бактерий, эритроцитов и других клеточных элементов. АГ – корпускулярный. Диагностикум – взвесь убитых бактерий определенного вида. Выделяется необходимый АГ, остальные инактивируются. Для получения Н-АГ – культуру обрабатывают формалином, ЛПС инактивируется. Для получения О-АГ – культуру прогревают, Н-АГ инактивируется, ЛПС остается, т.к. термостабилен. Диагностические агглютинирующие сыворотки получают путем гипериммунизации животных различными микробами. а) нативные или неадсорбированные – сыворотка, содержащая АТ ко всем АГ микроба, который использовали для иммунизации. б) адсорбированные, полученные путем адсорбции агглютининов по методу Кастеллани. - монорецепторные (моновалентные) – сыворотка, содержащая АТ к одному антигенному рецептору. - поливалентные – сыворотка, содержащая АТ к нескольким определенным антигенным рецепторам. Титр агглютинирующей сыворотки – наибольшее ее разведение, при котором реакция положительная. Диагностический титр реакции – титр реакции, который считают «+».
|
|||
Разновидность реакции агглютинации (РА) |
Компоненты реакции |
Применение |
Учет результатов |
Развернутая РА |
1)АГ – диагностикум или ч/к бактерий. 2)АТ – агглютинирующая сыворотка или сыворотка больного. 3)Электролит (изотонический раствор NaCl). |
1)Обнаружение АТ в сыворотке больного и определение их титра. 2)Определение вида микроба. |
«+» реакция - образование на дне пробирки осадка из склеившихся бактерий, жидкость в пробирке светлая, при встряхивании пробирки осадок превращается в хлопья (О – агглютинация – мелкие хлопья, Н – агглютинация – крупные хлопья). «-» реакция – в пробирке равномерное помутнение, осадок отсутствует. |
РА на стекле |
1)АГ – диагностикум или ч/к бактерий. 2)АТ – агглютинирующая сыворотка или сыворотка больного. 3)Электролит (изотонический раствор NaCl). |
1)Обнаружение АТ в сыворотке больного, например, при бруцеллезе (реакция Райта), брюшном тифе и паратифов (реакция Видаля), сыпного тифа (реакция Вейгеля), туляремии и др. 2) Определение вида микроба |
«+» реакция – появление хлопьев в капле. «-» реакция – капля равномерно мутная. |
РПГА (реакция пассивной гемагглютинации) |
1)АГ – эритроцитарный диагностикум – эритроциты человека или животных с осажденными на них АГ бактерий 2)АТ – эритроцитарный антительный диагностикум – эритроциты человека или животных с осажденными на них АТ 3)Электролит (изотонический раствор NaCl). |
Определение титра АТ в сыворотке больного. |
«+» реакция - образование осадка с неровными краями на дне лунки – «зонтик». «-» реакция -компактный осадок с ровными краями. |
Реакция Кумбса |
1)АГ – диагностикум 2)АТ – сывоторка больного 3)Антиглобулиновая сыворотка – сыворотка кролика, иммунизированного глобулинами сыворотки человека |
Обнаружение неполных АТ к форменным элементам крови или неполных антибактериальных АТ в первые дни заболевания. |
«+» реакция - образование на дне пробирки осадка.
|
РЕАКЦИЯ ПРЕЦИПИТАЦИИ Преципитация – явление осаждения антигена – преципитиногена из раствора при воздействии на него иммунной сыворотки, содержащей АТ преципитины. АГ – молекулярный. РП может ставится с полноценными АГ – веществами белковой природы и неполноценными АГ – гаптенами – липоидами, полисахаридами.
|
|||
Разновидность реакции преципитации (РП) |
Компоненты реакции |
Применение |
Учет результатов |
Реакция кольпреципитации |
1)АГ – преципитиноген – растворимый (молекулярный) АГ 2)АТ – преципитирующая сыворотка |
Для определения видовой и групповой принадлежности белка. |
«+» реакция - образование на границе сыворотки и АГ мутного кольца. |
РП в геле |
1)АГ – преципитиноген – растворимый (молекулярный) АГ 2)АТ – преципитирующая сыворотка |
Для определения токсигенности бактерий. |
«+» реакция - образование на месте встречи АГ и АТ беловатых полос преципитации «усов». |